តើធ្វើដូចម្តេចដើម្បីកំណត់ការផ្តោតអារម្មណ៍ល្អបំផុត?
សម្រាប់ inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) កំហាប់ខ្ពស់កាន់តែល្អ។កំហាប់ដ៏ល្អប្រសើរគឺអាស្រ័យលើលក្ខខណ្ឌពិសោធន៍ជាក់លាក់ និងឥទ្ធិពលនៃការចាប់ផ្តើមដែលចង់បាន។
ជាទូទៅការប្រមូលផ្តុំ IPTG ត្រូវបានប្រើក្នុងចន្លោះ 0.1-1 mM ។កំហាប់ទាបអាចកាត់បន្ថយផលប៉ះពាល់អវិជ្ជមានលើការលូតលាស់កោសិកា និងអាចកាត់បន្ថយសារធាតុ cytotoxicity ដោយសារតែការបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីនគោលដៅច្រើនពេក។កំហាប់ខ្ពស់អាចបណ្តាលឱ្យមានបន្ទុកមេតាបូលីសកោសិកាច្រើនពេក ដែលប៉ះពាល់ដល់ការលូតលាស់កោសិកា និងប្រសិទ្ធភាពនៃការបញ្ចេញមតិ។
មធ្យោបាយដើម្បីកំណត់កំហាប់ល្អបំផុតអាចជាការវាយតម្លៃកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិនៃប្រូតេអ៊ីនគោលដៅដោយការធ្វើតេស្ត IPTG induction នៅកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា។ការធ្វើតេស្តវប្បធម៌ខ្នាតតូចអាចត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើជួរនៃការប្រមូលផ្តុំ IPTG (ឧទាហរណ៍ 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM ។ ការរកឃើញ blot ឬ fluorescence) ។យោងតាមលទ្ធផលពិសោធន៍ ការផ្តោតអារម្មណ៍ដែលមានប្រសិទ្ធិភាពកន្សោមល្អបំផុតត្រូវបានជ្រើសរើសជាការផ្តោតអារម្មណ៍ល្អបំផុត។
លើសពីនេះ អ្នកក៏អាចយោងទៅលើអក្សរសិល្ប៍ដែលពាក់ព័ន្ធ ឬបទពិសោធន៍នៃមន្ទីរពិសោធន៍ផ្សេងទៀត ដើម្បីយល់ពីជួរកំហាប់ IPTG ដែលប្រើជាទូទៅនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌពិសោធន៍ស្រដៀងគ្នា ហើយបន្ទាប់មកបង្កើនប្រសិទ្ធភាព និងកែតម្រូវតាមតម្រូវការពិសោធន៍។
វាជាការសំខាន់ក្នុងការកត់សម្គាល់ថាការផ្តោតអារម្មណ៍ល្អបំផុតអាចប្រែប្រួលអាស្រ័យលើប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិផ្សេងៗគ្នា ប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ និងលក្ខខណ្ឌពិសោធន៍ ដូច្នេះវាជាការល្អបំផុតក្នុងការបង្កើនប្រសិទ្ធភាពតាមករណីនីមួយៗ។
ពេលវេលាប្រកាស៖ ថ្ងៃទី ២៨ ខែកញ្ញា ឆ្នាំ ២០២៣